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L'accesso con bicicletta, ad esclusione di quelle elettriche, sulle linee metro A e B e sulla ferrovia Roma-Lido è consentito nei giorni feriali dopo le 20.00 e il sabato e nei giorni festivi per tutta la durata del servizio. Passeggero e bicicletta sono ammessi solo sulla prima carrozza nella direzione di marcia del treno.

Per gli abbonati Metrebus il trasporto della bicicletta è gratuito, altrimenti anche per ogni bicicletta va acquistato un biglietto. Le biciclette pieghevoli non devono pagare il biglietto e sono ammesse tutti i giorni e per tutta la durata del servizio.

I gruppi numerosi (con più di 5 biciclette) dovranno segnalare, ai numeri telefonici di seguito indicati, la propria presenza con un anticipo di almeno 24 ore, per ricevere la necessaria assistenza:

metro A: 06.46957442;
metro B: 06.46957430;
ferrovia Roma-Lido: 06.46952561

Inoltre le domeniche ed i giorni festivi le bici possono salire a bordo dei bus della linea 791.

All’interno di alcune stazioni, nella zona di atrio aperta al pubblico, è disponibile un’area, appositamente attrezzata per la sosta, come parcheggio di interscambio bici/metro.
La sosta è consentita anche quando non è consentito l'accesso in metro con le bici.

Per agevolare quegli utenti che intendono usare la bici in combinazione con i mezzi del trasporto pubblico sono stati realizzati 370 posti bici, in luoghi coperti e presidiati, di 32 nodi di interscambio (metropolitana e ferrovia).

Metro A
Accesso in tutte le stazioni tranne: SPAGNA BARBERINI REPUBBLICA e TERMINI VITTORIO EMANUELE e SAN GIOVANNI

Metro B
Accesso in tutte le stazioni.

Posti bici:
PONTE MAMMOLO 10 posti
PIRAMIDE - lato FS 10 posti
BASILICA S. PAOLO 10 posti
EUR PALASPORT (dir. Rebibbia) 12 posti
EUR FERMI (dir. Rebibbia) 12 posti
 
Roma-Lido
Accesso in tutte le stazioni.

Posti bici:
PORTA S. PAOLO 20 posti
BASILICA S. PAOLO 10 posti
VITINIA 10 posti
ACILIA 10 posti
LIDO NORD 10 posti
LIDO CENTRO 10 posti
STELLA POLARE 10 posti 
 
L'ATAC non effettua alcuna attività di custodia e, quindi, non garantisce da eventuali danni o furti alle biciclette lasciate in sosta.